酶抑(yì)製率法檢(jiǎn)測原理:
多通(tōng)道(dào)農藥(yào)殘(cán)留速測儀(yí)采用國家標準GB/T規定的(dí)分析方法。該(gāi)方(fāng)法采用(yòng)酶抑(yì)製率法(分(fēn)光(guāng)光度法),分析原(yuán)理是(shì)基於一種(zhǒng)生(shēng)物化學反應,即在正(zhèng)常(cháng)情況下乙酰膽(dǎn)鹼(底物(wù))在乙(yǐ)酰膽(dǎn)鹼酯(zhǐ)酶(méi)的(dí)作用下發生(shēng)水解反應,生成膽(dǎn)鹼(jiǎn)和乙(yǐ)酸(suān),生成(chéng)的(dí)膽鹼與(yǔ)二(èr)硫雙(shuāng)對(duì)硝基(jī)苯甲酸(顯色劑)產(chǎn)生(shēng)顯色(sè)反應,使反應液呈黃(huáng)色。如(rú)果(guǒ)樣(yàng)品中帶有有機磷和(hé)氨基甲(jiǎ)酸酯(zhǐ)類(lèi)農藥,由(yóu)於農藥(yào)的存(cún)在能抑製酶的(dí)活性,使上(shàng)述(shù)生物化學反(fǎn)應速(sù)度(dù)減慢,從(cóng)而使水(shuǐ)解(jiě)反應生成的(dí)膽(dǎn)鹼減少,使(shǐ)顯色反(fǎn)應(yīng)產(chǎn)生的黃色變淺。通過測(cè)量一(yī)段反(fǎn)應(yīng)時間(jiān)內溶液顏色的變(biàn)化率(shuài)(吸光度(dù)隨時間(jiān)的變化(huà)值(zhí)),即表示為(wéi)農藥抑製(zhì)酶活(huó)性的抑製率。通過(guò)測量抑製(zhì)率的大小(xiǎo),可以(yǐ)判(pàn)斷出(chū)樣品中是(shì)否(fǒu)有(yǒu)高(gāo)劑量農藥的存在。
酶(méi)抑製率法產(chǎn)生(shēng)假陽(yáng)性問題(tí)的(dí)原因(yīn):
酶抑製率法測定(dìng)某(mǒu)些蔬菜(cài)中農藥殘(cán)留量(liáng)存(cún)在(zài)假陽性(xìng),這(zhè)一(yī)點(diǎn)在(zài)國(guó)家標準GB/T說(shuō)明中就(jiù)明(míng)確(què)指(zhǐ)出:“蔥,蒜(suàn),蘿(luó)卜,韭菜,芹菜(cài),香菜,茭白,蘑菇(gū)及番(fān)茄(qié)汁液中,含有(yǒu)對酶有影響的植(zhí)物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性”。
綜(zōng)合文(wén)獻資料(liào)和研(yán)究,發現產生(shēng)假陽性(xìng)的原(yuán)因(yīn):
1.某(mǒu)些(xiē)蔬(shū)菜(cài)樣(yàng)品中含(hán)有對(duì)酶有(yǒu)抑(yì)製(zhì)作(zuò)用的植物次生物(wù)質,它同樣(yàng)也(yě)能(néng)起到農藥抑製酶(méi)活性(xìng)的(dí)作用(yòng),故(gù)會(huì)使(shǐ)測定結果偏高(gāo),即產(chǎn)生(shēng)假(jiǎ)陽性(xìng),嚴重時使酶*失(shī)去活(huó)性,導致(zhì)無法測量(liáng)(如(rú)蒜(suàn))。
2.另一(yī)類蔬(shū)菜色素(sù)含量高(gāo)(如韭菜(cài)含葉(yè)綠素(sù)高(gāo)),汁液多(如番(fān)茄等(děng)),經樣(yàng)品(pǐn)處(chǔ)理後(hòu)會(huì)使測(cè)試(shì)溶(róng)液帶色或發渾,而這些(xiē)帶(dài)色或發渾(hún)的溶(róng)液(yè)在測(cè)試時容易發生(shēng)變化(huà),從而影響光度法(fǎ)的(dí)測定。